Como projetar primers para PCR

Os oligonucleótidos, ou *primers*, são essenciais quando se realiza uma reação de PCR. É necessário projetar *primers* que sejam complementares à região molde do ADN. Eles são sintetizados quimicamente, unindo nucleótidos um a um. Para isso, é preciso bloquear e desbloquear repetidamente os grupos reativos de um nucleótido enquanto se adiciona um nucleótido de cada vez.

A propriedade principal dos *primers* é que eles devem corresponder a sequências na molécula molde (ser complementares à fita molde). No entanto, não precisam corresponder integralmente à fita molde; é fundamental, porém, que a extremidade 3’ do *primer* corresponda exatamente à fita de ADN molde para que a elongação possa prosseguir. Geralmente, usa-se uma guanina ou uma citosina na extremidade 3’, e a extremidade 5’ do *primer* costuma ter sequências de vários nucleótidos. Além disso, as duas extremidades 3’ dos *primers* hibridizados devem estar voltadas uma para a outra.

Capítulos:
0:00 Introdução ao projeto de *primers*
0:57 Comprimento dos *primers*
1:26 Temperaturas de anelamento e fusão
2:27 Composição dos nucleótidos no *primer*
3:20 Estrutura secundária
4:04 Você acabou de projetar um *primer*!

Créditos
Com: Jennifer Tsang
Filmado por: Jennifer Tsang
Roteiro: Jennifer Tsang & Quintin Marcelino
Direção, animação e edição: Quintin Marcelino